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DETALLE DEL EXÁMEN
Norovirus antígeno fecal (ELISA)
Sección: Microbiología
Código: MB012
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Descripción

Detección cualitativa de antígeno fecal de norovirus (genogrupos I y II) mediante enzimoinmunoensayo de microplaca en fase sólida con anticuerpos monoclonales en muestra de heces fresca, refrigerada o congelada.

Utilidad Clínica

Este examen es para ser utilizado en muestras fecales de pacientes con vómitos y diarrea para determinar específicamente la presencia de norovirus mediante enzimoinmunoensayo (ELISA). Este es un método de diagnóstico más rápido, técnicamente más simple y bastante menos costoso que el de reacción en cadena de polimerasa de trascripción inversa (RT-PCR). El diagnóstico por RT-PCR, sin embargo, es más sensible (menos falso negativos) que por ELISA. La prueba es clínicamente útil en pacientes con gastroenteritis aguda, sea éste un caso individual o parte de un brote epidémico, en los que se sospecha que la causa podría ser un virus enteropatógeno.

Información clínica

Aunque inicialmente se consideró que ocurría sólo en brotes epidémicos, ahora se reconoce que norovirus ocurre también en casos individuales y es realmente la causa más frecuente de gastroenteritis endémica en adultos y la segunda más frecuente en niños, después de rotavirus (Junquera CG et al. Pediatr Infect Dis J 2009;28:604-7). Norovirus es considerado también uno de los agentes causales más frecuente de diarrea del viajero (Ajami N et al. Clin Infect Dis 2010;51:123-30). La enfermedad comienza típicamente después de un periodo de incubación de 12 a 48 horas con vómitos, fiebre y dolor abdominal, seguido poco después por diarreas acuosas que pueden durar hasta 5 días (Rockx B et al. Clin Infect Dis 2002;35:246-53). En recién nacidos la infección por norovirus puede ser muy severa y presentarse con enteritis hemorrágica y desarrollo de enterocolitis necrosante (Stuart RL et al. Pediatr Infect Dis J 2010;29:644-7). Se han descrito numerosos brotes epidémicos por norovirus involucrando personas de toda edad en hogares de ancianos, cunas infantiles, hospitales, cruceros vacacionales, restaurantes y eventos sociales que incluyen comida contratada (Glass RI et al. N Engl J Med 2009;361:1776-85). Norovirus comprende actualmente cinco genogrupos de los cuales sólo los genogrupos I y II (que tienen 15 y 18 genotipos respectivamente) son patógenos para el ser humano; a pesar de esta diversidad, la mayoría de casos y brotes reportados en los últimos años se deben al genotipo 4 del genogrupo II (Widdowson MA et al. J Infect Dis 2004;190:27–36). El diagnóstico de esta infección tiene el propósito de evitar el uso innecesario de antibióticos en un caso individual o identificar la causa en un brote epidémico y tomar oportunamente las medidas para controlarlo.

Muestra

Heces frescas, refrigeradas o congeladas, en recipiente apropiado

Recipiente

Frasco limpio, seco, de boca ancha y tapa hermética

Volumen

Mínimo 5 mL (5 g) – Mayor cantidad si conjuntamente se solicitan otros exámenes

Instrucciones para obtención y transporte de la muestra

Obtener la muestra en frasco limpio de boca ancha y tapa hermética. No mezclar la muestra con orina, cremas o talco. Colectar la mayor cantidad posible. En niños pequeños colocar el pañal al revés (por la parte no absorbente), cubrir la salida de la uretra con un trozo de algodón (para no contaminar la muestra con orina) y trasvasar la muestra al frasco. Muestras en pañal no son aceptables. Enviar la muestra al laboratorio inmediatamente después de su obtención en caja térmica con refrigerantes. Muestras de lugares fuera de Lima o que no pueden ser enviadas al laboratorio antes de 3 horas desde su obtención deben ser congeladas a -20°C hasta su envío. Muestras en un medio de preservación como Cary-Blair son aceptables para esta prueba. No colectar la muestra en recipientes que contengan formol o compuestos similares, sueros animales, iones metálicos, agentes oxidantes o detergentes debido a posibles interferencias con la prueba.

Método de análisis

Enzimoinmunoensayo (ELISA) de microplaca en fase sólida

Rango de resultados

Positivo o negativo

Rango normal

No hay antígeno de norovirus

Tiempo de entrega de resultados

6 - 12 horas desde recibida la muestra

Interpretación de resultados

Esta prueba en formato ELISA detecta, mediante anticuerpos monoclonales, antígenos de la cápside de prácticamente todos los genotipos conocidos de norovirus de los genogrupos I y II que pudieran estar presente en la materia fecal. La especificidad de esta prueba es de 99.2% comparada con diagnóstico por reacción en cadena de polimerasa de trascripción inversa (RT-PCR) (Gray JJ et al. Clin Vaccine Immunol 2007;14:1349-55). Un resultado POSITIVO con esta prueba, por tanto, indica firmemente la presencia de norovirus y que este podría ser la causa de los síntomas del paciente. Si el resultado se informa NEGATIVO es probable que norovirus no esté realmente en el intestino. La sensibilidad de esta prueba comparada con RT-PCR es de 76.3% según una evaluación hecha en Japón (Okitsu-Negishi S et al. J Clin Microbiol 2006;44:3784-6) y 69.5% según otra evaluación en Europa (Gray JJ et al. Clin Vaccine Immunol 2007;14:1349-55) por lo que un resultado NEGATIVO con esta prueba no excluye totalmente el diagnóstico. Un resultado falso NEGATIVO puede deberse a una carga viral por debajo del nivel de detección del ELISA al momento de colectar la muestra o a un deterioro del antígeno viral durante su trasporte al laboratorio. Esta prueba es específica para norovirus, un resultado POSITIVO ó NEGATIVO con esta prueba no excluye la presencia de otros agentes enteropatógenos. Esta información es sólo para ser tomada en cuenta. El médico es el más indicado para decidir lo que se deba hacer en base a los síntomas, el cuadro clínico y el resultado de esta prueba.

Limitaciones y recomendaciones
  1. Mantener la muestra refrigerada desde su obtención hasta la llegada al laboratorio; el antígeno del norovirus puede deteriorarse en muestras expuestas a temperaturas elevadas durante el transporte al laboratorio;
  2. Si el resultado de la prueba es NEGATIVO y la sospecha de la infección es muy fuerte puede ser conveniente repetir la prueba en una nueva muestra.
Horario de recepción de muestras

Lunes a Viernes de 7:15 AM a 8:30 PM
Sábados de 7:15 AM a 6:30 PM

Referencias
  1. Junquera CG et al. Prevalence and clinical characteristics of norovirus gastroenteritis among hospitalized children in Spain. Pediatr Infect Dis J 2009;28:604-7 PubMed 19561424
  2. Ajami N et al. Characterization of norovirus-associated traveler's diarrhea. Clin Infect Dis 2010;51:123-30 PubMed  20540620
  3. Rockx B et al. Natural history of human calicivirus infection: a prospective cohort study. Clin Infect Dis 2002;35:246-53 PubMed 12115089
  4. Stuart RL et al. An outbreak of necrotizing enterocolitis associated with norovirus genotype GII.3. Pediatr Infect Dis J 2010;29:644-7 PubMed 20589982
  5. Glass RI et al. Norovirus gastroenteritis. N Engl J Med 2009;361:1776-85 PubMed 19864676
  6. Widdowson MA et al. Outbreaks of acute gastroenteritis on cruise ships and on land: identification of a predominant circulating strain of norovirus--United States, 2002. J Infect Dis 2004;190:27–36 PubMed 15195240
  7. Gray JJ et al. European multicenter evaluation of commercial enzyme immunoassays for detecting norovirus antigen in fecal samples. Clin Vaccine Immunol 2007;14:1349-55 PubMed 17715333
  8. Okitsu-Negishi S et al. Detection of norovirus antigens from recombinant virus-like particles and stool samples by a commercial norovirus enzyme-linked immunosorbent assay kit. J Clin Microbiol 2006;44:3784-6 PubMed 17021111
Última revisiónSeptiembre 2010