DESCARGAR| Descripción | Detección cualitativa de antígeno fecal de rotavirus (Grupo A) mediante enzimoinmunoensayo de microplaca en fase sólida con anticuerpos policlonales en muestra de heces fresca, refrigerada o congelada. |
| Utilidad Clínica | Este examen es para ser utilizado como ayuda diagnóstica en pacientes con gastroenteritis aguda para detectar la presencia de rotavirus. Es también útil en la investigación de brotes de diarrea en instituciones como guarderías, nidos, salas de hospitalización y asilos. La detección del antígeno fecal de rotavirus mediante ELISA tiene mejor precisión diagnóstica que con la técnica de látex (Moosai RB et al. J Clin Pathol 1985;38:694-700). |
| Información clínica | Rotavirus es la causa más común de diarrea infecciosa no bacteriana, especialmente en niños hasta los 2-3 años de edad (Ehrenkranz P et al. Pan Am J Public Health 2001;10:240-7). Puede afectar también a niños mayores y adultos aunque en este grupo los síntomas suelen ser más leves y la enfermedad más corta excepto si es un adulto mayor o tiene alguna condición de inmunosupresión (Anderson EJ et al. Lancet Infect Dis 2004;4:91-9). La infección por rotavirus ocurre todo el año aunque tiende a aumentar durante los meses de invierno (Török TJ et al. Pediatr Infect Dis J 1997;16:941-6). Es un virus altamente transmisible que puede fácilmente ocasionar brotes con numerosos casos en instituciones como hospitales, guarderías, nidos y asilos (Festini F et al. BMC Infect Dis 2010;10:235). Las medidas sanitarias convencionales de higiene no son por lo general suficientes para evitar la transmisión del rotavirus (Velazquez FR et al. Ped Infect Dis J 2004;23:S149-S55). La prevención más efectiva de esta infección se logra con vacunas (Committee on infectious diseases. Pediatrics 2009;123:1412-20). La enfermedad típica se inicia de manera brusca primero con vómitos y fiebre seguido horas después por diarreas acuosas sin moco o sangre (Staat MA et al. Pediatr Infect Dis J 2002;21:221-7); toda la enfermedad puede durar de 5 a 8 días independientemente de la edad del paciente (Albano F et al. Eur J Pediatr 2007;166:241-7). |
| Muestra | Heces frescas, refrigeradas o congeladas, en recipiente apropiado |
| Recipiente | Frasco limpio, seco, de boca ancha y tapa hermética |
| Volumen | Mínimo 5 mL (5 g) – Mayor cantidad si conjuntamente se solicitan otros exámenes |
| Instrucciones para obtención y transporte de la muestra | Obtener la muestra en frasco limpio de boca ancha y tapa hermética. No mezclar la muestra con orina, cremas o talco. Colectar la mayor cantidad posible. En niños pequeños colocar el pañal al revés (por la parte no absorbente), cubrir la salida de la uretra con un trozo de algodón (para no contaminar la muestra con orina) y trasvasar la muestra al frasco. Muestras en pañal no son aceptables. Enviar la muestra al laboratorio inmediatamente después de su obtención en caja térmica con refrigerantes. Muestras de lugares fuera de Lima o que no pueden ser enviadas al laboratorio antes de 3 horas desde su obtención deben ser congeladas a -20°C hasta su envío. Muestras en un medio de preservación como Cary-Blair no son aceptables para esta prueba. No colectar la muestra en recipientes que contengan medios de transporte, formol o compuestos similares, sueros animales, iones metálicos, agentes oxidantes o detergentes debido a posibles interferencias con la prueba. |
| Método de análisis | Enzimoinmunoensayo (ELISA) de microplaca en fase sólida con anticuerpos policlonales. Los pocillos de la microplaca de titulación están recubiertos con anticuerpo policlonal contra antígeno específico de rotavirus Grupo A. El sobrenadante de una suspensión de la muestra, así como el anticuerpo policlonal marcado con peroxidasa se pipetean en los pocillos. El antígeno de rotavirus presente en la suspensión de la muestra se une tanto al anticuerpo en la microplaca, como al anticuerpo marcado con peroxidasa formando un complejo ‘sándwich’. El conjugado de enzima que no se combina se elimina mediante el lavado de la microplaca. Después de añadir el sustrato, si la muestra es positiva, la enzima enlazada transforma el color de la solución en los pocillos de la microplaca de incolora hacia el azul. Mediante la adición del reactivo de parada se lleva a cabo un cambio de color del azul al amarillo. La absorbancia se lee en espectrofotómetro a 450/620 nm y se expresa como positiva o negativa en relación al valor límite predeterminado (cut off). |
| Rango de resultados | Positivo o negativo |
| Rango normal | No hay antígeno de rotavirus |
| Tiempo de entrega de resultados | 6 – 12 horas desde recibida la muestra |
| Interpretación de resultados | Comparado con microscopía electrónica y otra prueba ELISA de referencia, la prueba de detección del antígeno fecal de rotavirus con anticuerpos policlonales tiene una especificidad de 99.2% (Kok TW et al. J Clin Microbiol 1989;27:364-6) por lo que un resultado POSITIVO con esta prueba confirma que hay una infección intestinal por rotavirus y que ésta podría ser la causa de los síntomas del paciente. Si el resultado se informa NEGATIVO es probable que no haya realmente una infección por rotavirus. La sensibilidad de esta prueba es de 100.0% (Kok TW et al. J Clin Microbiol 1989;27:364-6). Un resultado falso NEGATIVO (la enfermedad existe pero la prueba no lo detecta) puede deberse a que la muestra se colectó cuando la excreción fecal del virus había declinado a niveles por debajo del nivel de detección del ELISA o a un deterioro del antígeno durante su trasporte al laboratorio (ver más abajo, limitaciones y recomendaciones). Esta prueba es específica para rotavirus, un resultado POSITIVO o NEGATIVO con esta prueba no excluye la presencia de otros agentes enteropatógenos. Esta información es sólo para ser tomada en cuenta. El médico es el más indicado para decidir lo que se deba hacer en base a los síntomas, el cuadro clínico y el resultado de esta prueba. |
| Limitaciones y recomendaciones |
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| Horario de recepción de muestras | Lunes a Viernes de 7:15 AM a 8:30 PM |
| Referencias |
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| Última revisión | Enero 2014 |